Dados do Trabalho

Título

MODULAÇÃO DE PROTEÍNAS QUINASES NA INVESTIGAÇÃO DA ENZIMA CONVERSORA DE ANGIOTENSINA COMO TRANSDUTORA DE VIAS DE SINALIZAÇÃO.

Introdução

O Sistema Renina-Angiotensina (SRA) é um sistema hormonal associado com a homeostasia hidroeletrolítica e o controle da pressão arterial. O peptídeo angiotensina II (ANGII) é o principal e mais potente produto biologicamente ativo do sistema, o qual é produzido pela ação da Enzima Conversora de Angiotensina (ECA) na Angiotensina I. A desregulação do SRA constitui um importante fator no desenvolvimento e progressão de doenças cardiovasculares e diabetes. Além disso, recentemente o uso de inibidor da ECA (iECA) tem sido associado à ativação de vias de sinalização, assim a ECA pode atuar como uma molécula transdutora de sinal.

Objetivo

Evidenciar a importância de vias de sinalização desencadeadas pela ECA e de proteínas que são diferencialmente reguladas quando as células CHO-ECA são tratadas com os iECA, buscando entender a influência dos radicais sulfidril e carboxil.

Método

Células CHO-ECA, foram cultivadas com meio Dmem alta glicose e tratadas com Captopril(1uM) e enalapril(1uM)  para a análise de ensaio de Quinase Array . Além da avaliação do fator de crescimento epidérmico (EGF) por kit Elisa.  

Resultados

A matriz de quinase demonstrou que algumas vias foram moduladas positivamente após o tratamento com captopril após 2 minutos (AMPKa1, HSP27, Akt 1/2/3 T308) e após 5 (STATa / b, HSP60, b-Catenina). Algumas quinases foram negativamente moduladas após o tratamento com captopril (p53, PLC-γ1, Pyk2, eNOS). Enquanto o tratamento com enalapril (1 µM) modulou proteínas diferentemente em ambos os tempos de tratamento. Algumas fosfo-proteínas quinases foram positivamente moduladas em 2 minutos, tais como, PLC γ1, PYK2 e Yes. e outras positivamente moduladas em 5 minutos:   EGFR, GSK-3α/β, Lyn, PDGF Rβ, STAT 5a/b, WNK1 e STAT3 S2. As quinases AKT 1/2/3 T308, AKT 1/2/3 S743, CREB, Chk-2, c-Jun, JNK1/2/3, Lck, p38α, STAT3 Y705, β-Catenin foram moduladas positivamente em 2 e 5 minutos. As quinases eNOS, ERK1/2, GSK-3β, HSP27, p53 S15, p53 S46, MSK1/2, p70 S6 T389, p70 S6 T421/S424, PRAS40, Src, RSK1/2, RSK1/2/3, STAT1 e HSP60 foram moduladas negativamente em 2 e 5 minutos. A análise do EGF não apresentou diferença significativa entre os grupos.  

Conclusão

Assim como o captopril, o enalapril após ligar-se a ECA modulou as quinases evidenciando o papel da ECA como um receptor e vias de sinalização foram desencadeadas por essa ligação, desta forma pode-se sugerir que a ECA poderia ser um candidato a desempenhar não apenas um papel de enzima, mas também de proteína receptora e transdutora de sinalização.